PALCAM Agar Base - CM0877

조성(Typical Formulation)

조제 (Directions)

PALCOM Selective Supplement (SR0150)을 첨가:

500ml의 정제수에 34.5g을 현탁하고 천천히 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브하여 멸균한다. 50°C로 식힌 후, 설명서에 따라 재구성한 PALCAM Selective Supplement를 무균적으로 첨가한다. 잘 혼합후 무균 페트리 접시에 붓는다.

Egg Yolk Emulsion (SR0047)을 2.5%(v/v) 첨가하면 손상된 Listeria의 회수에 도움이 될 수 있다.

사용(Technique)

Listeria monocytogenes의 분리 방법은 시험할 물질에 따라 다르다.분리 및 동정전에 증식을 하기 위해 증균 액체 배지에 검체를 먼저 접종하는 것이 일반적이다. PALCAM Medium 평판에 접종하기 전에 사용될 검체에 따라서 적절한 방법 및 선택적 증균 액체배지가 사용되어야 한다. 일반적인 규칙으로서 유제품의 경우 Listeria Selective Enrichment Medium (CM0862 + SR0149), 육류 및 가금류의 경우 Listeria Selective Enrichment Media UVM (CM0863 + SR0142 또는 + SR0143)와 Fraser Broth (CM0895 + SR0156)을 사용한다.

1.    선택적 증균 액체 배지 1루프를 PALCAM Medium 평판에 접종한다.

2.    37°C에서 48시간 동안 미호기성 조건하에서 배양한다. (CampyGen CN0025 또는 CN0035 사용)

3.    48시간 동안 배양한 후 Listeria의 전형적인 집락에 대해서 시험한다.

4.    Listeria spp로 추정되는 집락을 생화학적 및 혈청학적 시험을 통해 확정해야 한다⁸.

48시간 배양후 전형적인 Listeria spp는 직경 약 2mm이고 검정색의 움푹 들어간 중심이 있는 회색-녹색 집락. 체리색-적색 배지 배경에 대해서 검정색 환이 있다. 때때로 enterococci 나 staphylococci가 PALCAM 배지에서 발달하여 갈색-녹색 환을 가진 회색 집락 또는 노란색 환을 가진 노란색 집락을 형성한다.

주의사항(Precautions)

Ÿ Acriflavine hydrochloride는 빛에 의해 활성화되어 Listeria 성장을 억제시킬 수 있다.

설명(Description)

PALCAM Medium은 Van Netten 등¹이 기술한 조성에 기반하며 식품에서 Listeria monocytogenes의 분리에 권고된다.

식품에서 Listeria monocytogenes 존재를 둘러싼 인식과 관심이 높아지면서 그것을 분리하기 위한 많은 배지들이 개발되었다^2,3,4,5. 그러나, Cassiday 및 Brackett⁶은 현재로는 모든 식품 형태에 대해 사용 가능한 단일의 방법이 없다는 결론을 내렸다.

PALCAM Medium은 lithium chloride, ceftazidime, polymyxin B, acriflavine hydrochloride가 존재하기 때문에 고도로 선택적이다. 2중의 지시약 체계를 활용하여 Listeria monocytogenes의 쉬운 분별적 진단을 허락해준다:

1.    Aesculin and ferrous ion

2.    Mannitol and phenol red

Listeria monocytogenes는 aesculin을 가수분해하여 집락 주위에 검정색 환을 형성시킨다. Listeria monocytogenes는 mannitol을 발효하지 않아서 mannitol을 발효하는 enterococci 및 staphylococci 같은 오염균들로부터 쉬운 분별이 가능하다. 이러한 상황은 pH 지시약인 phenol red의 적색을 노란색으로 변화시킨다. PALCAM 배지에 egg yolk을 첨가시키면 손상된 세포의 치료에 도움이 되는 것으로 보고되었다³.

미호기성 조건하에서 배양하면 Bacillus spp. 및 Pseudomonas spp.같은 절대호기성균을 억제한다. PALCAM medium의 표면 위에 혈액을 포함한 배지를 깔고 배양하면 용혈성 Listeria spp.을 분별하고 계수할 수 있다⁷.

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지: 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용.

선택제: 2-8°C에서 차광보관. 라벨 표시 유효기간까지 사용.

조제배지: 2-8°C에서 차광하여 최대 4주간 보관가능.

성상 (Appearance)

분말배지 : 짚색의 유동성 분말

조제배지 : 적색의 젤

품질관리(Quality Control)