Fraser Broth Base - CM0895

조성(Typical Formulation)

설명(Description)

Fraser Broth는 USDA-FSIS의 UVM 2차 증균 액체배지의 변형이며 Fraser와 Sperber¹가 기술한 조성에 기반한다. 여기에는 ferric ammonium citrate 및 lithium chloride가 포함된다. 배지의 흑색화는 Listeria의 존재를 추정적으로 증명해준다. 초기 검출과는 대조적으로, 흑색화되지 않은 배양액이 Listeria가 없는 것으로 추정될 수는 없다. 모든 Fraser Broth 증균 배양액은 평판배지에 계대배양해야 한다.

이 배지는 Listeria 분리를 위한 USDA-FSIS법에서 2차 증균 배지로사용했을 때, 식품 및 환경 검체에서 Listeria spp.의 분리를 위해 개발되었다. UVM primary 및 secondary 증균 액체배지를 이용하는 USDA-FSIS 2단계 증균법은 육류 제품 시험에 가장 적합하다. Fraser Broth는 식품 및 환경 검체에서 Listeria spp.를 검출하는데 상당히 정확하다는 것이 증명되었다^1,2.

모든 Listeria spp.는 aesculin을 aesculetin으로 가수분해한다. Aesculetin은 철이온과 반응하여 흑색화가 초래된다. Ferric ammonium citrate의 다른 장점은 철이온이 Listeria monocytogenes의 성장을 촉진한다는 것이다³. Lithium chloride는 마찬가지로 aesculin을 가수분해할 수 있는 enterococci의 성장을 억제시키기 위해 배지에 첨가된다. DNA 탐침법과 함께 사용할 때는 주의가 필요하다. 이 배지의 고농도의 염이 검출에 억제 효과를 보일 수 있다⁴.

Half Fraser Broth는 손상된 세포의 회복에 도움을 주기위해 nalidixic acid 및 acriflavine hydrochloride의 농도가 반만 포함된 Fraser Broth의 변경된 형태이다. Half Fraser Broth는 Listeria의 검출을 위한 ISO 방법론⁵에서 1차 증균 액체배지로써 사용된다. 

조제 (Directions)

Fraser Supplement (SR0156)을 첨가할 경우:

28.7g의 Fraser Broth Base를 500ml 정제수에 현탁하고 잘 혼합하여 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다. 50°C로 식힌 후, 설명서에 따라 재구성한 1바이알의 SR0156을 무균적으로 첨가한다. 잘 혼합 후 멸균된 용기에 분주한다.

Half Fraser Supplement (SR0166)을 첨가할 경우:

12.9g의 Fraser Broth Base를 225ml 정제수에 현탁하고 잘 혼합하여 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다. 50°C로 식힌 후, 설명서에 따라 재구성한 1바이알의 SR0166E를 무균적으로 첨가한다. 잘 혼합 후 멸균된 용기에 분주한다.

2.25liter 배지를 조제할 경우, 129.0g의Fraser Broth Base와 1바이알의 SR0166G를 사용한다.  

사용(Technique)

1.    10ml의 Fraser Broth에 20~24시간 배양한 1차 증균 액체 배양액(즉, FDA 또는 UVM I 증균 액체 배양액) 0.1ml을 접종한다.

2.    26±2시간*동안 35°C에서 배양한다.

3.    흰색 배경에 대고 각각의 접종된 시험관과 대조군을 비교한다. 어두워졌거나 검정색으로 변한 시험관을 Oxford Medium 또는 PALCAM Medium에 계대배양한다. 원래의 노란색을 유지하는 시험관들 또한 평판배지에 접종하도록 하고 Listeria spp.가 없는 것으로 확인한 후에 폐기하도록 한다.

* Fraser Medium은 검정색 발색이 이루어지도록 최소 24시간 배양을 확실히 하기 위해 26±2시간동안 배양해야 한다.

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지 : 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용

선택적 첨가제는 2-8°C에서 차광하여 보관하고 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용

조제배지 : 2-8°C에서 최대 2주간 보관한다.

성상 (Appearance)

분말배지 : 짚색의 유동성 분말

조제배지 : 짚색의 용액

품질관리(Quality Control)

Fraser Broth 및 Half Fraser Broth