사용목적(Use)
식품에서 Listeria 종의 선택적 증균을 위한 배지
조성(Typical Formulation)
성분* |
gm/litre |
Tryptone soya broth |
30.0 |
Yeast extract |
6.0 |
pH 7.3 ± 0.2 @ 25°C |
|
*성능표준을 위해 조절될 수 있음 |
조제 (Directions)
Listeria Selective Enrichment Supplement
(SR0141)을 첨가할 경우:
Vial contents (each vial
is sufficient for 500ml of medium) |
per vial |
per litre |
Nalidixic acid |
20.0mg |
40.0mg |
Cycloheximide |
25.0mg |
50.0mg |
Acriflavine hydrochloride |
7.5mg |
15.0mg |
18g의 CM0862를 500ml의 정제수에 현탁하고 2ml의 정제수로 재구성한 Listeria Selective Enrichment
Supplement (SR0141)을 첨가한다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다. 50°C로 식힌 후 잘 혼합하고 필요한 부피로 멸균 용기에 분주한다.
Listeria Selective Enrichment
Supplement, Modified (SR0149)을 첨가할 경우:
Vial contents (each vial
is sufficient for 2,250ml of medium) |
per vial |
per litre |
Nalidixic acid |
90.0mg |
40.0mg |
Cycloheximide |
112.5mg |
50.0mg |
Acriflavine hydrochloride |
22.5mg |
10.0mg |
1바이알의 SR0149에 10ml의 정제수를 무균적으로 첨가하고 가볍게 거꾸로
해서 완전히 녹인다. 해당 내용물을 2.25리터의 Listeria Enrichment Broth Base에 첨가한다. 121°C에서 15분간 오토클레이브하여 멸균한다. 50°C까지 식힌 후 잘 혼합하고 필요한 부피로 멸균 용기에 분주한다.
설명(Description)
Listeria
Selective Enrichment Medium은 Lovett 등1이
기술한 조성에 기반하며 식품에서 Listeria 종들의 선택적 증균에 권장된다. 이 증균과정은 원유(raw milk)에서 10cfu/ml 이하의 접종량을 회복하는 것으로 나타났다.
더 높은 분리률을 이루려면 1, 2 및 7일 후에 증균 액체 배지를 Listeria Selective Agar 평판에 계대배양하는 것이 권장된다.
Agello 등2은 배양 기간을 7일로
확장할 경우 우유 및 우유제품에서 환경적으로 스트레스 받은 리스테리아의 회복이 더 잘 되는 것으로 보고하였다.
사용(Technique)
1. 225ml의 Listeria
Selective Enrichment Broth에 25g 또는 25ml의 검체를 첨가한다.
2. 30°C에서 7일간 배양한다.
3. 1,2, 및 7일 후에 Listeria Selective Enrichment Broth로부터
Listeria Selective Agar 평판*에 다음
방법으로 계대배양한다:
(i) Listeria
Selective Agar 평판에 직접 도말
(ii) Listeria
Selective Enrichment Broth 배양액 1ml을 9ml의 0.5% KOH에 넣고 볼텍스로 혼합한 후 Listeria Selective
Agar 평판에 도말한다.
* 적절한 Listeria Selective Agar에는
1. Listeria Selective Medium(Oxford formulation)(CM0856+SR0140)
2. PALCAM Medium (CM0877+SR0150)
이 있다.
주의사항(Precautions)
액체 배양액은 평판상의 집락보다 더 위험하다.
조제된 배지는 차광하여 보관해야 한다. Acriflavine이 광산화되어 Listeria에 억제성 화합물을 형성할 수 있다.
이 배지에 사용되는 SR0141은 독성 농도의 cycloheximide가
포함되므로 위험물로 취급하고 주의해야 한다.