Bolton Selective Enrichment Broth - CM0983

조성(Typical Formulation)

조제 (Directions)

Bolton Broth Selective Supplement (SR0183)을 첨가:

500ml의 정제수에 13.8g을 첨가하고 121°C에서 15분간 오토클레이브하여 멸균한다. 50°C로 식힌 후, 25ml의 Laked Horse Blood (SR0048)과 설명서에 따라 재구성한 1바이알의 Bolton Broth Selective Supplement(SR0183)를 무균적으로 첨가한다. 잘 혼합 후 상단이 스크류 형태인 용기에 분주한다.

Modified Bolton Broth Selective Supplement (SR0208)을 첨가:

인체에 유해한 cycloheximide가 Amphotericin B로 변경됨. 조제 및사용 방법은 SR0183과 동일함.

사용(Technique)

사용법 중 한 가지는 다음과 같다:

25g의 식품검체를 225ml의 Bolton Selective Enrichment Broth에 넣고 Stomacher(또는 그 상당 장비)를 이용하여 혼합물을 균질화 한다. 이 배지는 미호기성 환경에서 배양이 필요하지 않지만, 용기 상단에서 20mm내로 내용물이 채워진 스크류 달린 용기를 사용해야한다⁴. 37°C에서 4시간 동안 배양하고 42°C에서 추가 배양한다. 24시간 그리고 48시간 후에 Modified CCDA (CM0739+SR0155) 또는 Preston Agar (CM0689+SR0117+SR0048)에 계대배양한다⁴.

기타 다른 방법에 대해서는 BAM을 참조한다⁵.

설명(Description)

Campylobacter는 그람-음성, 나선 모양의 미호기성 미생물이며 원유, 미처리수, 부적합하게 취급된 식품, 그리고 덜 조리된 고기, 가금류 및 조개류에 존재한다. 이 미생물을 섭취하게 되면 일시적 무증상의 정착에서부터 심각한 이질에 까지 다양한 임상적 질병을 초래할 수 있다. 캠필로박터 장염의 증상에는 설사, 복통, 메스꺼움, 발열, 두통 및 근육통이 있다. Campylobacter jejuni에 의한 감염의 합병증에는 복통, 반응성 관절염 또는 기니아-바레(Guillian-Barre) 증후군¹의 결과로 불필요한 충수 절제가 포함될 수 있다. Campylobacter 감염은 사람에서 세균성 위장염의 가장 일반적인 원인중 하나로 인식되며 최소 감염 량은 500-800 cells 만큼 낮다¹.

사람 질병에서 Campylobacter의 명백한 역할의 인식이 1977년 Skirrow에 의해 고조되었기 때문에², 많은 수의 배지들이 성능을 최적화하기 위한 요구에 부응하여 개발되었다. 식품가공 및 보존 기술이 Campylobacter 세포에 줄 수 있는 손상 효과를 극복하기 위해    검체를 시험할 때 증균 배지의 필요성에 대해서 초기 인식이 있었다. 증균 초기 단계에서 보다 낮은 배양 온도의 사용이 세포 회복에 도움을 주는 것으로 현재는 널리 확립되었다³. 이 원리는 Bolton에 의해 이용되어 증균 액체 배지 개발로 이어졌다⁴.

Campylobacter는 식품 처리 및 보존 방법에 의해 손상받을 수 있다³. 이로 인해 손상받지 않는 세포가 내성을 가지는 선택적 억제제에 손상받은 세포들이 민감하게 된다. Bolton Selective Enrichment Broth같은 회복배지는 먼저 손상된 세포들을 복구하고 증식을 촉진시켜서 배양 가능한 세포의 수를 증가시켜 위음성 결과를 피할 수 있다.

Bolton Selective Enrichment Broth는 아사 상태로 손상받은 세포의 복구를 도와주는 영양분을 포함하며 미호기성 대기에 대한 필요성을 없애준다. 초기 배양은 시험할 식품의 형태에 따라서 30-37°C에서 수행된다. 전-배양후에 배양 온도를 42°C로 올려서 경쟁 미생물에 대한 선택 압력을 증가시킨다.

Sodium metabisulphite 및 sodium pyruvate는 배지에서 생성될 수 있는 독성 화합물을 제거하고 배양물의 호기-내성을 증가시킨다. 첨가제에 포함된 항생제는 Campylobacter spp.에 대한 선택성을 최적화 한다: Vancomycin은 그람-양성균에 대해 활성; Cefoperazone은 그람-음성에 대해서 우세하게 활성; Trimethoprim은 다양한 그람-음성 및 그람 양성 미생물에 활성; Cycloheximide는 효모에 활성이다.

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지: 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용.

조제배지: 2-8°C에서 최대 2주간 보관가능.

성상 (Appearance)

분말배지 : 짚색의 유동성 분말

조제배지 : 작은 검정색 입자가 보이는 짚색의 용액

품질관리(Quality Control)

Modified CCDA에 계대배양 한 후의 예상 결과.