제   조   사 : Oxoid
유 효 기 간 : 365일
판 매 상 태 : 판매중
보         관 : 10~30℃
용         도 : 미생물 선택 구별
500g

CM0201B

Salmonella typhi 및 기타 salmonellae의 분리를 위한 Wilson and Blair Medium의 변형. 유당을 발효하는 salmonellae의 분리에 유용함.

식품공전의 Bismuth Sulfite 한천배지 (Bismuth Sulfite Agar)와 동일한 조성이다.

조성(Typical Formulation)

성분*

gm/litre

Peptone

5.0

`Lab-Lemco powder

5.0

Glucose

5.0

Disodium phosphate

4.0

Ferrous sulphate

0.3

Bismuth sulphite indicator

8.0

Brilliant green

0.016

Agar

12.7

pH 7.6 ± 0.2 @ 25°C

*성능표준을 위해 조절될 수 있음

 

조제 (Directions)

1리터의 플라스크에 든 500ml의 정제수에 20.0g을 현탁하고 자주 교반하면서 열을 가한다. 배지가 끓기 시작하면 30초간 뭉근히 끓여서 한천을 완전히 녹인다. 50-55°C로 식힌 후 잘 혼합하고 두꺼운 평판을 만든다 (평판 당 25ml 배지). 뚜껑을 닫지 않은 상태로 응고시킨다. 많은 주의를 기울이고 적절한 상층 공간(head space)이 확보되면 더 큰 부피로 평판을 만들 수도 있다.

사용 전에 평판을 건조하고 초과 건조는 피한다. 잘 조제된 배지는 부드럽고, 창백한 짚색으로 크림 같이 불투명하며, 지시약의 침전이 없어야 한다.

과열하지 말 것 오토클레이브 하지 말 것

  

사용(Technique)

이 배지는 직접평판법 이나 증균배지로부터 salmonellae의 분리를 위한 다른 선택적 장내세균용 한천배지와 병행하여 사용될 수 있다8. 따라서 다음의 계획이 인용될 수 있다.

Bismuth Sulphite Agar 및 다음 중 하나 이상에 직접 접종한다:

Desoxycholate Citrate Agar (CM0227) 또는 DCLS Agar (CM0393)

XLD Agar (CM0469)

Brilliant Green Agar (CM0329)

MacConkey Agar No.3 (CM0115)

동시에 증균 액체 배지, 예를 들면 Selenite Broth Base(CM0395)+Sodium Biselenite LP0121, Mueller-Kauffmann Tetrathionate Broth (CM0343) 또는 Mueller-Kauffmann Tetrathionate-Novobiocin Broth (MKTT-n) (CM1048), 에 접종한다. 12-18시간 배양 후 Bismuth Sulphite Agar 및 기타 선택배지상에 계대 배양한다. 18시간 배양 후 평판을 관찰하고 의심 집락을 동정 배지, 예를 들면 Kligler Iron Agar (CM0033)에 계대 배양한다.

모든 음성 평판은 48시간 동안 배양해야 한다.

 

Organism

Appearance

Salmonella typhi

18시간 배양 집락 주위에 검정색 영역과 금속성 광채가 있는 검정색의 토끼눈 집락. 48시간 배양 후에는 균일하게 검정색

Other Salmonella species

18시간 다양한 집락 성상으로 검정색, 녹색, 또는 투명하고 점성이 보인다. 48시간 후에는 균일하게 검정색 집락이 관찰되고 종종 폭넓은 배지의 염색과 뚜렷한 금속성 광채를 가짐

Other organisms, e.g. coliform bacteria, Serratia, Proteus species

일반적으로 억제되지만 금속성 광채가 없거나 배경 배지의 염색이 있는 둔한 녹색 또는 갈색 집락을 종종 보인다.

 

주의사항(Precautions)

Ÿ 조제된 평판 배지는 2-8°C에서 최대2일간 보관하고 이 기간 이후에 brilliant green은 산화되어 녹색 배지를 나타내고 일부 salmonellae에 억제적일 수 있다.

Ÿ Shigella 종들은 일반적으로 완전히 억제된다.

Ÿ Salmonella sendai, Salmonella cholera-suis, Salmonella berta, Salmonella gallinarum, Salmonella abortus-equi는 현저히 억제된다9.

Ÿ 스프레딩법이 잘 분리된 집락을 만들어 낸다. 만일 성장이 너무 많거나 합류적(confluent)이라면 전형적인 집락 특성이 나타나지 않을 것이다; Salmonella typhi 집락은 이러한 환경하에서 밝은 녹색을 보인다. 따라서 의심이 된다면 배지상의 거의 모든 성장 집락을 추가 시험에 포함시켜야 한다.  

 

설명(Description)

Bismuth Sulphite Agar는 병원성 물질, 하수, 공급수, 식품, 그리고 오염이 의심되는 기타 생산물에서 Salmonella typhi 및 기타 salmonellae의 분리 및 1차 동정을 위한 Wilson Blair1의 선택 배지의 변형이다. 이 배지에서 새로이 침전된 bismuth sulphite는 대장균군의 성장을 억제하지만 salmonellae의 성장을 허락하는 선택제인 brilliant green과 함께 작용한다. 황화합물은 황화수소 생성을 위한 기질을 제공하며 금속 염(metallic salts)은 집락을 염색하고 주위의 배지를 황화수소 존재하에서 검정색 또는 갈색으로 염색시킨다.

배지를 유기물질로 많이 접종하게되면 비 전형적인 집락이 나타날 수 있다. 그러한 상황은 멸균 생리식염수에 검체를 현탁하거나 접종에 상층액을 사용함으로써 방지할 수 있다.

신선하게 조제된 배지는 강력한 억제 작용을 가지며2 심하게 오염된 검체에 적당하다. 조제된 배지를 4°C에서 3일간 보관하면 배지의 색상이 녹색으로 바뀌고, 적은 수의 salmonellae가 회수될 경우 선택성이 떨어진다3. 그러나 Salmonella typhi 회수의 경우, 후자의 방법은 권장되지 않는다4.

 

Salmonellae의 수가 작을 것으로 기대되는 경우 증균 방법을 포함시킬 수도 있다. 이 배지는 여러 권위자로부터 추천된다5,6,7.

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지: 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용. 반응성이 있고 흡습성인 성분들이 포함되어 있어, 습기에 노출되면 제품이 빠르게 악화된다. 이것은 고체의 잘 부스러지지 않는 덩어리로 응집되고 갈색으로 변색되는 것으로 알수 있다. 그러한 분분말로부터 조제된 배지는 갈색을 나타내고 저장 후에도 녹색으로 변하지 않으며 분별적 및 선택적 특성이 소실되는 것이 특징이다. 이러한 이유로 분말은 차고 건조한 곳에 보관해야 하며 개봉 후에 용기는 적절히 봉해야 한다.

 

조제배지: 2-8°C에서 최대2일간 보관. 이 기간 이후에 brilliant green은 산화되어 녹색 배지를 나타내고 일부 salmonellae에 억제적일 수 있다.

 

성상 (Appearance)

분말배지 : 밝은 녹색의 유동성 분말

조제배지 : 창백한 녹색의 젤

 

품질관리(Quality Control)

Salmonella typhi는 일반 시험실 또는 식품 실험실이 아닌 Class 3 실험실에서만 사용해야 한다.

양성대조군

예상 결과

Salmonella Poona NCTC 4840*

좋은 성장; 금속성 광채가 있는 검정색 집락

Salmonella Typhimurium ATCC® 14028*

좋은 성장; 금속성 광채가 있는 검정색 집락

음성대조군

예상 결과

Staphylococcus aureus ATCC® 6538*

성장 없음

Enterococcus faecalis ATCC® 29212*

성장 없음

* Quanti-Cult Plus®로 판매되고 있음

  • 미생물 배양 / 용도 : 미생물 선택 구별
    살모넬라(Salmonella)의 분리를 위한 선택적 증균 배지
  • 미생물 배양 / 용도 : 미생물 선택 구별
    임상 검체 및 식품에서 salmonella 및 shigella의 분리를 위한 선택배지.식품공전의 XLD한천배지와 동일한 조성이다.
  • 미생물 배양 / 용도 : 미생물 선택 구별
    분변 및 식품에서 살모넬라 분리를 위한 증균 배지. 첨가제 사용 후 식품공전 Selenite F 배지와 동일함.
  • 미생물 배양 / 용도 : 미생물 선택 구별
    Salmonella 및 Shigella의 분리를 위한 선택적 배지
  • 미생물 배양 / 용도 : 미생물 선택 구별
    그람 양성 미구균(micrococci)을 억제하면서, 대장균군과 젖산 비발효균간의 구별을 훌륭하게 해주는 선택 배지