조성(Typical Formulation)
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성분* |
gm/litre |
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Peptone |
20.0 |
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Lactose |
10.0 |
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Bile salts No.3 |
1.5 |
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Sodium chloride |
5.0 |
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Neutral red |
0.03 |
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Crystal violet |
0.001 |
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Agar |
15.0 |
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pH 7.1 ± 0.2 @ 25°C |
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*성능표준을 위해 조절될 수 있음 |
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조제 (Directions)
51.5g을 1리터의 정제수에 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브하여 멸균한다.
설명(Description)
대장균군의 검출 및 계수에 적합하며
병원성 검체 및 식품검체에서발생하는Salmonella 및 Shigella
종들의 검출 및 분리에도 적합한 선택성이 보다 향상된 MacConkey 배지이다. Crystal violet과 특별히 제조된 bile salts를
포함하여 그람 양성 미구균(micrococci)을 억제하면서, 대장균군과
젖산 비발효균간의 구별을 향상시켜준다.
이 조성은 APHA1가 권장하는 다음 시험법의 조성과 부합된다: the
direct plating of water samples for coliform bacilli, the examination of food
samples for food poisoning orgarnisms2, the isolation of Salmonella
and Shigella species in cheese3.
이 배지의 다른 용도는 다음과
같다: 가금류 분변 시료에서 대장균군(coli-aerogenes) 세균의
계수4; 소 및 양의 분변에서 대장균군
세균의 계수5; 가금류 사체에서 대장균군
및 유당 비발효성 미생물의 계수6; 방사성
조사한 저민 닭 통조림에서 세균 계수7; Aeromonas
속에 대한 연구시 대장균군 세균들의 검출8
Anderson
등9은 MacConkey Agar에 10mg/ml의 kanamycin을 넣어 신생아 수막염을 초래하는
Citrobacter diversus의 전염성 균주를 분리하였다.
1리터의 MacConkey Agar에 100mg의 4-methylumbelliferyl-ß-D-glucuronide를 첨가하여
ß-glucuronidase를 검출할 수 있다10. 절단된 4-methylumbelliferyl 부분은 366nm에서 형광을 발한다. 따라서 혼합 배양물에서 Escherichia coli의 집락은 35°C에서 밤샘 배양한 후 UV Lamp하에서 평판을 살펴보면 쉽게 검출가능하다. 그러나, 다른 미생물들 또한 ß-glucuronidase
양성일 수가 있음을 기억해야 한다.
사용(Technique)
접종 후 평판은 일반적으로 35°C에서 18~24시간동안 배양하고 유당 비발효 미생물을 찾고있지만 아직 나타나지 않은 경우 24시간 더 배양한다. 더 낮은 온도에서의 배양은 종종 보다 호냉성인 종들에 대해서 사용된다. 35°C에서 18시간 배양한 후에 대장균군은 강한 보라색-적색 집락을 나타내며 유당 비발효균들은 무색이다.
주의사항(Precautions)
장기간의 배양은 결과에 혼란을 줄 수 있다. 48시간 이상 배양하지 않는다.
R-단계에 있는 Shigella 종들의 실험실 보관 균주로 배지를 테스트하라. R-단계shigellae는 MacConkey
Agar에서 만족스럽게 성장한다.