Brilliance Enterobacter Sakazakii Agar (DFI formulation) - CM1055

조성(Typical Formulation)

조제 (Directions)

1리터의 정제수에 43.1g을 현탁하고 잘 혼합한 후 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브하여 멸균한다. 50°C로 식힌 후 잘 혼합하여 멸균 페트리접시에 붓는다. 

사용(Technique)

다음은 제안된 사용법이다. 현재의 가이드라인 및 권고사항을 참조해야 한다.

옥소이드 Brilliance^TM Enterobacter Sakazakii Agar는 FDA method 2002의 2가지 평판 배지를 대체하여 사용할 경우, 이유식 및 기타식품에서 E. sakazakii의 회수율을 증가시켜준다¹.

1.    배양된 EE Broth에서 접종 루프로 10µl를 취하여 Brilliance^TM Enterobacter Sakazakii Agar에 스트리킹 또는 스프레딩한다.

2.    35~37°C에서 24시간동안 배양하고 파란색-녹색 집락을 관찰한다.

3.    추정적인 파란색-녹색 집락을 생화학적으로 확정시험을 한다. (RapID ONE planel (R8311006)이나 Microbact 24E (MB1131A 또는 MB1074A)를 사용)

설명(Description)

Brilliance^TM Enterobacter Sakazakii Agar (DFI formulation¹)는 배지에 발색 기질인 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-α-D-glucopyranoside를 첨가하여 α-glucosidase 반응의 검출에 기반한다. Enterobacter sakazkii에 존재하는 α-glucosidase는 그 기질을 가수분해하여 창백한 노란색 배지색상 위에 파란색-녹색 집락을 나타낸다. Proteus vulgaris 또한 약하게 α-glucosidase 양성이며 E. sakazakii와 유사한 색상이 집락을 보이며 성장할 수 있다. 하지만 이 배지에서 Proteus spp.는 회색 집락으로 성장한다: 이 미생물은 ferric ions 존재하에서 hydrogen sulphide를 생성하고 ferrous sulphide를 형성한다. Desoxycholate는 대부분의 그람-양성 미생물들의 성장을 억제한다.

Enterobacter sakazakii는 그람-음성, 막대 모양 세균이며 건강한 성인에서 드물게 질병을 초래한다. 신생아에서 질병 발생에 관여한다. 연구에 따르면, 신생아 또는 기타 의학적 질환을 가지는 유아는 이 감염에 더 감수적이다. 보고된 감염의 대부분은 패혈증, 수막염, 괴사성 장염 등으로 심각하다. 신경손상은 영구적이 될 수 있으며 치사율은 40~80%로 높은 것으로 보고된다².

Enterobacter sakazakii는 분말 이유식에서 낮은 수준으로 분리되는 기회성 병원균이다. 이 미생물의 높은 건조 내성은 건조 환경에서 경쟁적 장점을 제공하고 있으며, 분유 공장에서 발견되는 것 처럼,  파스퇴르 처리 후 최종 제품의 오염 위험을 증가시킨다³.

Enterobacter sakazakii를 검출하기 위한 현재의 FDA 방법³은 노란색 색소 생산에 기반하며 Muytjens 등⁴의 개척적인 연구에 기원한다. 검체를 물에 밤샘 배양한 후 EE Broth(CM0317)에서 증균하고 VBRGA(CM0485)상에 플레이팅하여 장내세균군(Enterobacteriaceae)을 분리한다. 5개 집락을 선택하여 Tryptone Soya Agar (CM0131)에 스트리킹하고 최대 3일간 배양한 후 전형적인 Enterobacter sakazakii 집락인 노란색 집락을 관찰한다. 그러나 이 방법은 Enterbacter sakazakii에 선택적이지 않으며 EE Broth와 VRBGA의 병행 사용으로 장내세균이 E. sakazakii보다 더 성장할 수 있어 위음성의 결과를 초래할 수 있다. 집락 성상에 기반하여 VRBGA 평판에서 E. sakazakii 집락을 선택하는 것은 불가능하다; E. sakazakii가 다른 장내세균들과 같게 나타날 것이기 때문이다.

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지: 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용

조제배지: 2~8°C에서 최대 2주간 보관

성상 (Appearance)

분말배지 : 짚색의 유동성 분말

조제배지 : 창백한 노란색 젤

품질관리(Quality Control)