조성
| 성분* | gm/litre |
| Tryptone | 20 |
| Lactose | 5 |
| Bile salts No. 3 | 1.5 |
| Di-potassium phosphate | 4 |
| Mono-potassium phosphate | 1.5 |
| Sodium chloride | 5 |
| pH 6.9 ± 0.2 @ 25°C | |
| *성능표준을 위해 조절될 수 있음 | |
조제법
37g을 1리터의 정제수에 녹인다. 최종 용기에 분주하고 121°C, 15분간 오토클레이브하여 멸균한다.
설명
EC Broth는 분변 대장균군의 구별 그리고 식품 및 환경 검체의 Escherichia coli에 대한 확인 시험을 위한 선택적 배지이다3,4. 또한 MPN법을 이용한 우유 및 우유제품에서 E. coli의 추정적 계수에 적당하다2.
Escherichia coli는 식품 및 물 검체에 존재하는 일반적인 그람 음성 미생물이다. E.coli의 존재는 비록 섭취했을 때 반드시 건강에 해를 끼치지는 않지만 분변에 의해 오염되었음을 의미한다. 하지만 일부 균주들은 설사에 원인이 되고 보다 심각한 질병을 초래할 수 도 있다.
물에 E. coli가 존재하면 분변 오염으로 간주되지만 신속한 동정법이 없기 때문에 비 특이적인 그룹인 분변 대장균군이 그런 오염의 지시자로 사용된다. 이러한 관점에서 분변 기원의 대장균군과 다른 기원의 대장균군간을 구별하는 것이 중요하다.
E.coli와 분변 대장균군에 대한 동정 기준은 다음의 사용된 방법에 따라 44-45.5°C에서 24-48시간 내에 유당(lactose)이 발효되어 산(acid)과 기체가 생성되는 것이다:
| Examination of shellfish4 | 44.5°C |
| Milk and milk products2 | 44.0°C |
| Water and wastewater3 | 44.5°C |
| Other foodstuffs4 | 45.5°C |
사용법
조성에는 완충형 유당 액체배지와 bile salts No.3가 포함되어 있다. bile salts는 포자 생성균과 enterococci의 성장을 억제하지만 E.coli와 대장균군의 성장은 억제하지 않는다. 유당 발효로 생성되는 기체는 Durham 튜브를 사용하여 확인할 수 있다.
1. 우유 및 우유제품 / 추정적 E.coli2 (ISO)
1배 및 2배 농도의 Lauryl Tryptose Broth(LTB, CM0451)와 Durham튜브가 든 시험관을 표준 방법으로 준비된 검체로 접종한다. 37°C에서 24-48시간 배양하고 기체 생성을 관찰한다. 기체 생성을 보이는 시험관을 Durham 튜브가 든 10ml의 EC Broth(CM0853)가 든 일련의 새로운 튜브에 접종한다. 44°C에서 24-48시간동안 배양한다. 기체 생성을 보이는 시험관을 Tryptone Water (CM0087)이 든 시험관에 접종하고 44°C에서 24-48시간동안 배양한다. 인돌 생성에 대해서 시험하고 추정적 E.coli의 최확수(MPN)를 계산한다. 자세한 사항은 ISO 표준 방법을 참고한다.
2. 분변 대장균군 시험3 (APHA)
분변 대장균군의 구별을 위해 Durham 튜브가 든 EC Broth(CM0853) 발효 시험관을 접종하고 44.5°C에서 24±2시간 동안 수조에서 배양한다. 24시간 정도내로 기체 생성 및 성장이 보이면 분변 대장균군 반응이 양성임을 간주한다. 자세한 설명은 APHA 표준 방법3을 참조한다.
3. E.coli에 대한 확정 시험4 (FDA/BAM)
기체 생성을 보이는 Lauryl Tryptose Broth (CM0451)로 부터 1루프의 균액을 취하여 Durham튜브가 든 EC Broth 시험관에 접종하고 45.5°C에서 배양하고, 24 및 48 시간후에 기체 생성을 관찰한다. 기체 생성된 시험관은 EMB agar(CM0069)에 도말하고 35°C에서 18-24시간동안 배양한다. 각 평판으로부터 2개의 의심 집락을 취하여 PCA(CM0325)에 접종하고 17-24시간동안 35°C에서 배양한다. 모양 및 생화학적 시험으로 확정한다. 자세한 내용은 FDA/BAM 표준방법4을 참조한다.