Baird Parker Agar Base - CM0275

조성(Typical Formulation)

조제 (Directions)

1리터의 정제수에 63.0g을 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브하여 멸균한다.  50°C로 식힌 후 무균적으로 50ml의 Egg Yolk Tellurite Emulsion (SR0054)를 첨가한다. 또는 50ml의 Egg Yolk Emulsion (SR0047) 및 3ml의 Potassium Tellurite 3.5% (SR0030)을 사용할 수도 있다. 잘 혼합 후 페트리 접시에 붓는다. 

사용(Technique)

1.    사용 전에 필요한 짧은 시간 동안 평판 표면을 건조시켜 준다.

2.    Buffered Peptone Water에 준비한 식품 검체 희석액 0.1ml을 한천 평판상에 건조될 때까지 스프레딩한다. 평판이 클 경우 0.5ml까지 사용가능하다.

3.    평판을 거꾸로 하여 35°C에서 배양한다. 24시간 후에 평판을 관찰하고 Staphylococcus aureus의 전형적인 집락을 찾는다. 음성 배양체는 추가로 24시간 더 배양한다.

정량적 결과

S. aureus 의심 집락을 계수하고 coagulase 반응 시험을 실시한다.

식품 g당 S. aureus 결과값을 보고한다.

주의사항(Precautions)

배지상에서의 음성 반응에 상관없이 모든 의심 집락을 S. aureus로 간주하고 추가 시험을 실시한다.

Coagulase 양성 집락에 아주 가깝게 성장하는 일부 오염 미생물의 집락들이 coagulase 양성 반응을 보여 환을 형성할 수도 있다.

설명(Description)

Barid-Parker¹는 Zebovitz 등²의 tellurite-glycine 조성으로부터 이 배지를 개발하였고 식품에서 Staphylococcus aureus를 분리하는데 신뢰성을 향상시켰다. Baird-Parker는 sodium pyruvate를 첨가하여 손상된 세포를 보호하고 회수율에 도움을 주었고 egg yolk emulsion은 진단제로 사용된다. 현재는 Staphylococcus aureus 분리에서 국가적 및 국제적 기관에서 폭넓게 권고되고 있다⁴.

선택제인 glycine, lithium 및 tellurite는 신중하게 균형이 잡혀 S. aureus를 억제하지 않으면서 식품에 존재하는 대부분의 세균들의 성장을 억제한다.

Egg Yolk Emulsion은 배지를 노란색 및 불투명으로 만든다. S. aureus는 tellurite를 환원시켜 회색-검정색 빛나는 집락을 생성한 후 단백질 분해 작용으로 집락의 주위에 투명한 영역을 생성한다. 전형적인 회색-검정색 집락이 있는 이 투명한 영역이 S. aureus의 진단 성상이다(전형적인 반응에 대해서는 표1 참조). 추가적인 배양하면 대부분의 S. aureus 균주들은 집락 주위에 불투명한 환을 형성한다. 이것은 lipase의 작용으로 추정된다. S. aureus 균주 모두가 이 두 가지 반응을 나타내는 것은 아니다. Staphylococcus saprophyticus의 일부 균주는 투명한 영역과 불투명 환을 모두 생성하지만 숙련된 실험자는 더 긴 배양시간으로 S. aureus로부터 이것을 구별할 수 있다⁵.

S. aureus의 전형적인 집락을 보이지만 egg yolk 반응이 없는 집락도 coagulase 생성에 대해서 시험해야 한다⁶. Egg yolk 반응이 음성인 S. aureus 균주는 일부 식품, 특히 치즈에서 발생될 수 있다. Smith 및 Baird-Parker⁷는 배지 ml당 50µg의 sulphametazine이 Proteus 종의 성장 및 swarming을 억제한다는 사실을 발견하였다. 따라서 소량의 S. aureus가 Proteus 균주가 혼합되어 포함된 시료로부터 회수될 수 있다.

Baird-Parker 및 Davenport⁸에 의해 손상된 staphylococci의 회수는 시험한 다른 회수 배지에서 보다 Baird-Parker 배지에서 크다는 것이 증명되었다. Broeke⁹ 및 de Waart 등¹⁰은 Baird-Parker 배지가 포도상구균 독 변증(staphyloenterotoxicosis)의 원인이 되는 식품들에 관한 생태학적 연구에서 가치있다는 것을 발견하였다. 시험된 522개의 균주들 중에서, 사람 및 식품 유래에서 분리된 97.5%가 Baird-Parker 배지에서 특징적으로 그리고 양적으로 발달하였다.

표1. Baird-Parker Egg Yolk Tellurite Medium에서 미생물의 전형적인 집락 특성

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지: 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용

조제배지: 신선하게 조제해서 사용¹¹.

성상 (Appearance)

분말배지 : 짚색-분홍색의 유동성 분말

조제배지 : 짚색의 젤

품질관리(Quality Control)