조성
| 성분* | gm/litre |
| Yeast extract | 4 |
| Peptone | 10 |
| Di-sodium hydrogen phosphate | 2.52 |
| Potassium di-hydrogen phosphate | 0.28 |
| Sodium pyruvate | 10 |
| Chromogenic mix | 1.2 |
| Agar | 13 |
| pH 7.2 ± 0.2 @ 25ºC | |
| *성능표준을 위해 조절될 수 있음 | |
조제법
20.5g을 500ml의 정제수에 현탁한다. 잘 혼합 후 끓여서 완전히 녹인다. 121ºC에서 15분간 오토클레이브하여 멸균한다. 배지를 50ºC로 식힌 후 준비된 Brilliance Bacillus cereus Selective Supplement SR0230E를 1vial을 무균적으로 첨가한다. 잘 혼합후 멸균 페트리접시에 붓는다.
설명
Bacillus cereus는 그람 양성, 호기성, 포자 생성, 막대형 세균이며 자연계에서 폭넓게 분포되어 있다. 이 균은 흙, 먼지, 곡물, 채소, 동물의 털, 민물, 퇴적물에서 쉽게 분리되기 때문에, 거의 모든 농산물에서 발견되는 것이 놀랍지 않다. 포장 생성능은 레토르트처리가 부족한 모든 식품 공정 단계에 걸쳐 생존을 가능하게 해주고, 식품 제조업에서 사용되는 대부분의 원료에 이 균이 존재한다. 일반적인 환경하에서는 B. cereus는 식품 gram당 3개의 세포가 발견되며, 질병 유발의 최소량이 gram당 105이상의 세포이기 때문에, 이것은 문제가 되지 않는다1.
Bacillus cereus와 관련된 위장염(gastroenteritis)은 균 성장의 영양세포 단계동안 생성되는 2가지 독소(구토형 독소와 장독소)의 섭취에 기인한다. 조리후 적절하지 못한 냉장 보관된 식품에서 주로 발생된다. 장독소는 분자량이 큰 단백질이며 설사형 질환을 유발한다. 발병은 오염된 식품 섭취 후 6-15시간내에 이루어진다. 구토형 질환은 저 분자량의, 열안정성 펩타이드에 의해 초래되는 것으로 믿으지며, 증상은 섭취 후 0.5~6시간내에 일어난다1.
육류, 우유, 채소, 어류를 포함한 다양한 식품들이 설사형 식중독과 관련이 있다. 구토형 질환응 일반적으로 쌀제품과 관련이 있으나 감자, 파스타같은 전분 음식과 치즈 제품 또한 관련이 있다. 소스, 푸딩, 수프, 캐서롤, 페스트리, 샐러드 같은 혼합형 식품들이 식중독 발생에 종종 관련되기도 한다2.
Brilliance Bacillus cereus Agar에는 발색형 기질인 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-ß-glucopyranoside가 포함되어 있으며, 이 기질은 이 균에 존재하는 ß-glucosidase에 의해 분해되어 청색/녹색 집락을 형성한다. Polymixin B는 대부분의 그람 음성균들과 Bacillus cereus를 제외한 일부 Bacillus균들을 포함한 그람 양성 균들 일부를 억제한다. Trimethoprim은 DNA 생성에 필수적인 folic acid 합성을 차단하며 Staphylococcus aureus, Enterococcus spp. 그리고 비-cereus Bacillus 종들 포함한 많은 그람 양성 균들에 대해서 활성을 보인다. 이 두가지 항생제의 조합 사용으로 polymyxin B만 사용되는 것 보다 효과적임이 보고되었다3.
Bacillus thuriniensis는 생화학적으로 Bacillus cereus와 동일하므로 이 균도 이 배지에서 청색/녹색 집락을 보여준다. B. thuringiensis는 주로 곤충 병원균으로 알려져 있지만 일부 인간 위장염 발병과 관련이 있는 것으로 보고되었다4.
사용법
다음은 제안 방법중의 하나이다.
1. Peptone Water (CM0009) 또는 MRD(CM0733)에 식품 검체의 10% 희석액(w/v)을 준비한다.
2. 적절한 실험용 blender를 사용하여 1분간 검체를 균질화 한다.
3. 균질액의 10-1, 10-2, 10-3 희석검체에서 0.1ml을 각각 취하여 Brilliance Bacillus cereus Agar 평판에 접종한다.
4. 37ºC에서 24시간 배양한다.
5. 전형적인 Bacillus cereus 집락을 관찰한다.
6. Bacillus cereus의 추정적 동정을 검증된 방법 (예, oxidase, 그람 염색)으로 확인한다.
7. 식품의 그람당 집락수로 결과를 보고한다.
주의사항
X-glucopyranoside negative B. cereus 균주들이 배지의 흰색 집락에 존재할 수 있도. 이것은 발색 기질을 사용할 수 없거나 사용활성이 약하기 때문이다.
