E.C. Broth (Reduced Bile Salts) - CM0990

 조성(Typical Formulation)

조제 (Directions)

Novobiocin Supplement(SR0181) 첨가하는 경우:

500ml의 정제수에 18.3g을 첨가하여 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다. 50°C로 식힌 후 제품설명서에 따라 재구성한 1바이알의 SR0181을 무균적으로 첨가한다. 잘 혼합후 멸균된 최종 용기에 분주한다.

사용(Technique)

사용법 중 하나는 다음과 같다. (Okrend³에 기반):

검체를 CM0990+SR0181 배지에 10배 희석한다. 2분간 Stomacher에서 분쇄한다. 100rpm 회전 교반기에서 37°C에서 6시간동안 배양한다. 다른 하나는 35°C에서 24시간 방치한다.

배양 후 교반된 배양액을 100배 희석하고, 24시간 방치된 배양액은 10⁶배 희석한다. 적당한 선택 한천배지**에 스트리킹한다.

** Sorbitol MacConkey Agar(SMAC), CM0813 또는 SMAC with BCIG, CM0981; 선택성을 향상시키기 위해 두 배지에 Cefixime Tellurite Selective Supplement SR0172를 첨가할 수도 있다.

37°C에서 24시간동안 배양한다. Escherichia coli O157 집락은 무색 투명하게 보인다. 의심되는 집락을 E.coli O157 Latex Test(DR0620) 또는 Dryspot E.coli O157 Latex Test (DR0120)를 사용하여 확인한다. 자세한 사용법은 각 제품설명서를 참조한다.

EC Broth(Reduced Bile Salts) 및 Novobiocin 첨가제는 육류 및 가금류제품에서 Escherichia coli O157:H7 및 O157:NM(NonMotile)의 검출을 위해서 USDA/FSIS⁴ 및 AIFST¹가 권고하는 증균 배지이다.

설명(Description)

Novobiocin은 Staphylococcus aureus(methicillin 내성 균주 포함)와기타 staphylococci 같은 그람-양성 세균에 활성인 항생제이다. Haemophilus influenzae, Neisseria spp. 및 일부 Proteus spp 균주를 포함하여 일부 그람-음성 미생물들도 감수성이 있지만 대부분의 장내세균군(Enterobacteriaceae)은 저항성이다.

Novobiocin은 주로 정균적(bacteriostatic)이지만 높은 농도에서는 보다 감수적인 종들에 대해서 살균적(bactericidal)일 수 있다. 일정 부분 RNA합성도 억제하지만, 주로 DNA 합성을 억제한다.

EC Broth(Reduced Bile Salts)는 식품 및 환경 검체, 특히 세균이 아사직전까지 손상된 냉동 식품 검체에서 직접 Escherichia coli O157의 증균을 위해 사용될 수 있다¹. Novobiocin은 보다 선택적인 1차 증균 배지를 제공하기 위해 첨가될 수 있다.

조성은 Szabo 등²의 권고에 기반하여 완충형 lactose broth와 양이 감소된 Bile Salt No.3가 포함된다. 낮은 농도의 bile salts는 spore 생성균 및 enterococci의 성장을 억제하지만 37°C에서 E.coli O157의 성장은 허용한다.

Okrend가 제안한 37°C 보다 낮은 온도가 적용되면 20mg/liter의 Novobiocin은 E.coli O157의 성장 감소 없이 배경 군집의 감소를 향상시켜준다³.

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지 : 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용

Novobiocin 첨가제: 2-8°C에서 차광보관한다. 지시사항에 따라 보관했을 경우, 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용가능.

성상 (Appearance)

분말배지 : 흰색의 유동성 분말

조제배지 : 짚색의 용액

품질관리(Quality Control)