MYP Agar (Mannitol Egg Yolk Polymyxin Agar) - CM0929

조성(Typical Formulation)

조제 (Directions)

Polymyxin B Supplement (SR0099)

450ml의 정제수에 21.5g을 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다. 약 49°C로 식힌 후, 설명서에 따라 재구성한 1바이알의 Polymyxin B Supplement(SR0099)와 50ml의 Egg Yolk Emulsion (SR0047)을 무균적으로 첨가하고 잘 혼합한 후 멸균 페트리 접시에 붓는다.  

사용(Technique)

한천 평판의 표면을 건조시킨다. Peptone Water(CM0009)에 적절한 희석을 하여 식품 검체를 준비한다.

희석 검체들을 0.1ml씩 각 평판에 스프레딩한다.

30°C에서 18~40시간 동안 배양한다.

전형적인 집락의 수를 세고 생존균수를 계산한다.

B. cereus의 전형적인 집락은 난황 침전으로 둘러싸인 밝은 분홍색배경을 가지며 거칠고 건조하다.

설명(Description)

Bacillus cereus는 1950년대 이후로 식중독이 원인균으로 인정되고 있다. 초기의 분리 방법들은 혈액배지를 사용하여 용혈과 집락 모양을 이용하여 B. cereus의심 집락의 검출한 후, 여러가지 확정 시험에 의존하였다. 이런 배지들의 주요 문제점은 선택적이지 않고 일반적으로 B. cereus의 수가 많은 경우 검출에 유용하다는 것이다.

B. cereus는 그람-양성, 막대 모양, 통성 호기성, 포자 생성 미생물이다. 세포는 크기가 크며(3.5μm) 때때로 짧은 사슬이나 긴 실모양을 형성하고 세포를 확장시키지 않는 중심에서 말단에 걸친 타원형의 포자를 가지고 있다. Glucose가 포함된 배지에서 성장할 때 염색되지 않는 과립이 세포내에 생성된다.

비록 20세기초 이후로 질병 발생과 관련된 식품에서 B. cereus가 존재한다는 것이 알려졌지만¹, 식중독에서 원인균으로서의 그 역할은 1950년대까지는 확립되지 않았다.

2가지 뚜렷한 증상인 구토(emetic)와 설사(diarrhoeal)가 B.cereus 관련 식품 유래 질병으로 발생된다. 설사형 질병은 열에 약한 고분자 단백질에 의해 초래되지만, 구토형 질병은 열에 안정한 저분자 펩타이드에 의해 초래된다².

육류기반 요리, 수프, 채소, 푸딩, 소스를 포함하여 다양한 식품들이 설사형과 관련이 있다². 구토형 증상은 보다 한정된 식품들, 약 95%가 튀기거나 찐 쌀과 관련되어 있다³. B.cereus가 연루된 질병을 유발하는 식품에는 일반적으로 최소10⁵CFU/g가 포함되어 있지만 발생의 약 10%는 그 이하가 포함된 식품과 관련이 있었다². 거의 모든 경우에 관련된 식품은 충분하지 않은 저장 온도에서 장기간 보 관된 경우이다.

MYP Agar는 Mossel 등⁴이 개발한 선택적이고 분별적인 배지이다. 배지의 진단 특성은 B.cereus가 mannitol을 이용하지 못하고 대부분의 균주들이 phospholipase C를 생성한다는 사실에 기초한다. Polymyxin B는 그람-음성 세균들을 억제한다. 이 배지는 기타 미생물 세포 10⁶당 1개의 B.cereus가 존재하는 비율에서도 B.cereus를 아주 효과적으로 검출하는 것으로 증명되었다⁴.

저장 조건 및 유효기간(Storage conditions and Shelf life)

분말배지 : 원래 용기에 완전히 밀봉하여 10-30°C에서 보관. 라벨에 표시된 유효기한 전 까지 사용

첨가제 SR0099 : 2-8°C에 보관.

조제배지 : 2-8°C 보관.

성상 (Appearance)

분말배지 : 짚색의 유동성 분말

조제배지 : 적색 젤

품질관리(Quality Control)